孔雀石绿法测定溶液中无机磷
本试验在研究钼酸铵、孔雀石绿和柠檬酸浓度对显色影响的基础上,用孔雀石绿试剂分析无机磷,得到的磷标线R2=0.9998,测定5个标准管光吸收的标准差为0.00418,变异系数为2.20％.一般所用的孔雀绿为孔雀绿的氯化物，但由于孔雀绿定磷法的灵敏度很高，试验试剂和操作条件对测定结果影响很大，同一实验体系在不同实验室进行操作，结果的重复性不是很好。鉴于相同的反应原理，本试验利用孔雀石绿(孔雀绿草酸盐)替代孔雀绿建立了孔雀石绿法测定溶液中无机磷。该方法的测定机制与孔雀绿定磷法相同:磷酸根与钥酸根在酸性条件下形成磷钥杂多酸缔合物，然后又与孔雀绿形成的弱键复合物为显色复合物。当反应体系中加人酸酸化后，没形成复合物的孔雀绿在较高酸度下就会褪色，而显色复合物则能保持稳定。大多文献报道的酸化液一般是硫酸，在反应过程中易挥发。本试验用柠檬酸作酸化液，使反应体系的酸度能保持恒定，有利于未形成显色复合物的孔雀绿褪色，显色稳定性可达8小时以上，而传统的孔雀绿方法虽然灵敏度较高但很不稳定。另外，用柠檬酸还可以防止有机磷和酶的底物ATP在酸性钥酸钱条件下经非酶促水解释出无机磷，这对本试验的下一步测定蛋白激酶活性是必要的条件。
无机磷 孔雀石绿法 磷标线 变异系数
徐幸福 郑日如 王彩云
华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉430070
国内会议
郑州
中文
520-524
2013-08-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）