hTERTC27基因对神经胶质瘤的杀伤效应
目的：研究用树突状细胞携带hTERTC27基因对胶质瘤细胞的杀伤作用及其机理. 方法：将C57BL/6小鼠胫骨和股骨的骨髓冲洗下来,利用红细胞溶解液溶解其中的红细胞.然后与重组鼠源的GM-CSF、IL-4和LPS同培养.在第7天,收集培养液中非贴壁细胞作为目的细胞.流式细胞仪检测分析DCs的表型标志物.腺病毒介导的基因转染DCs.提取细胞的蛋白电离后转到硝酸纤维素膜进行蛋白质印迹分析.再进行细胞毒性试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的水平. 结果：在7d后的细胞培养后,收集了出现典型的形态特征的成熟DCs.其结果表明成熟的DCs表达高水平的CD80、CD86和MHCⅡ,其阳性率分别为87.3％、88.8％和93.8％.Ad-C27和Ad-EGFP腺病毒被用于转染DCs,结果荧光显微镜下大多数的DCs表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP).而Ad-C27转染48h的DCs,利用抗hTERT的抗体可在蛋白印迹分析中,检测到hTERTC27蛋白的表达.腺病毒转染的树突状细胞刺激的细胞毒性T淋巴细胞,其能力的表现是通过检测它们能否溶解肿瘤细胞.在效应细胞/靶细胞的比率为40∶1时,Ad-C27转染的树突状细胞刺激的细胞毒性超过50％.Adv-C27转染的树突状细胞介导U87细胞的溶解率为(50.4±2.95)％,远远高于Adv-EGFP转染的树突状细胞介导的(38.0±1.81)％,以及正常树突状细胞介导的(33.7±2.03)％.T细胞与Adv-C27转染的树突状细胞,Adv-EGFP转染的树突状细胞,以及正常树突状细胞共培养3d,其上清中的IL-2和IFN-γ浓度用ELISA法检测.与AdC27-DCs共培养的T细胞能产生(75.54±5.32)pg/ml的IL-2和(60.86±2.61)pg/ml的IFN-γ,远远高于其他两组. 结论：负载hTERTC27的DCs能提高T细胞上清中IL-2和IFN-γ的水平.对U87神经胶质瘤细胞产生巨大的毒性杀伤作用.
神经胶质瘤 hTERTC27基因 树突状细胞 杀伤作用
何蕾 黎祥喷 王鸿轩 彭英
510120 中山大学孙逸仙纪念医院神经科
国内会议
第五届中国中西医结合学会神经科专业委员会第十二次全国中西医结合神经科学术年会
兰州
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586-590
2016-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）