会议专题

2型猪链球菌细胞分裂蛋白DivIVA基因功能研究

目的:通过构建2型猪链球菌(SS2)细胞分裂调控蛋白divIVA基因突变株△divIVA,研究该基因在调控细胞分裂及SS2致病性中的作用. 方法:构建中间携有壮观霉素(Spc)抗性,两端为divIVA基因同源臂的敲除质粒pUC18:divIVA,将pUC18:divIVA电转入SS2感受态细胞中,利用细菌同源重组获得△divIVA突变株;比较SS2与△divIVA基本生物学特征、细胞体外实验和小鼠体内毒力实验差异,分析divIVA基因功能及作用. 结果:经组合PCR和组合酶切验证成功构建敲除质粒pUC18:divIVA,经PCR及测序分析成功构建△divIVA.比较SS2与△divIVA生物学特征发现,△divIVA生长速率减慢,菌落直径变小;通过显微观察发现,△divIVA细胞形态发生明显变化,细胞荚膜变薄,细胞分裂畸形,隔膜形成异常,细胞聚集形成团块等;体外细胞实验表明,△divIVA对Hep-2细胞的黏附能力增强,对小鼠巨噬细胞(Raw264.7)的抗吞噬能力减弱,对人中性粒细胞(PMNs)的抗吞噬能力减弱;动物感染实验表明,△divIVA菌株对小鼠无致病性. 结论:以上结果表明divIVA基因对SS2细胞分裂及致病性调控具有重要作用.

2型猪链球菌 细胞分裂 divIVA基因 蛋白表达

倪华 过雨晴 杜世仁 张剑 范伟伟 孙卫平 王长军 曹祥荣 潘秀珍

南京军区军事医学研究所,江苏南京210000;南京师范大学,江苏南京210046 南京军区军事医学研究所,江苏南京210000 南京师范大学,江苏南京210046

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2016-05-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)