利用改良SOE-PCR技术克隆TuMV CDN1-VPg基因
芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)是白菜生产中的三大病害之一.TuMV利用白菜的翻译起始因子(eIF(iso)4E)进行复制、翻译及增殖,TuMV株系间的差异在eIF(iso)4E与TuMV互作过程中产生显著影响,因此单点突变体的制备对于研究基因功能的表达至关重要.通过序列比对发现,TuMV C4/CDN1-VPg间存在5个差异氨基酸位点.本研究采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以TuMV C4-VPg基因序列为模板,定点突变核苷酸,获得TuMV CDN1-VPg基因的5个单突变体以及TuMV CDN1-VPg基因全长.该研究为进一步揭示白菜eIF(iso)4E基因与TuMV的互作机制奠定材料基础,同时也建立了一套高效、便捷、经济的DNA定点突变方法.
白菜 芜菁花叶病毒 翻译起始因子 基因克隆
李国亮 钱伟 张淑江 李菲 章时藩 张慧 谢露露 武剑 王晓武 孙日飞
中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081
国内会议
广州
中文
302-307
2016-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）