牛α0干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及抗病毒活性鉴定

摘要：

目的：本研究克隆了牛α0干扰素(BoIFN-α0)成熟肽基因,使其在真核细胞中表达并研究其表达蛋白的活性. 方法：通过PCR方法扩增得到BoIFN-α0成熟肽基因,然后将其连接到含分泌信号肽序列的Pichia pastoris表达载体pPICZαA上,构建重组质粒pPICZαA-BoIFN-α0,重组质粒经PmeI酶切线性化后电转化宿主菌GS115.转化子经100μg/Ml zeocinTM筛选和PCR鉴定,阳性重组菌经甲醇诱导后实现了BoIFN-α0在毕赤酵母系统中的分泌表达. 结果：SDS-PAGE和Western blot结果显示表达产物分子量约为18kDa和21kDa,推测表达产物发生了一定程度的糖基化.细胞病变抑制试验结果表明,重组BoIFN-α0具有较高的抗病毒活性达到5.72×106U/mg. 结论：这些研究结果为牛IFN-α的更深层次的应用奠定基础.

关键词： 牛 干扰素α亚型 毕赤酵母 分泌表达 抗病毒活性

作者: 彭统全 邵建伟 张润祥 曹翀 马波 高明春 王君伟

作者单位: 东北农业大学 动物医学学院,黑龙江 哈尔滨150030

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会养牛学分会第八届全国会员代表大会暨2015年学术研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 618-623

在线出版日期: 2015-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）