重组囊素肽的构建表达及其对禽流感灭活苗免疫效果的影响
为了探索制备囊素活性肽的有效方法,本实验以囊素五肽和三肽的氨基酸序列为基本单元,设计了3种不同串联方式的囊素肽片段,按照大肠杆菌偏爱密码子设计引物,利用SOE-PCR技术扩增了3种的囊素肽编码基因,分别构建重组质粒pET-32a-BS1、pET-32a-BS2和pET-32a-BS3,并转化于大肠杆菌OrigamiTMB中诱导表达.SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明,3种重组囊素肽BS1、BS2和BS3均以可溶形式存在上清液中,与天然囊素肽有相似的免疫原性.免疫效果监测表明,3种重组囊素肽在大肠杆菌中成功表达,免疫效果检测结果表明,与单独免疫灭活抗原组相比,3种重组囊素肽均能明显促进鸡血清中抗体产生,提高外周血淋巴细胞增殖能力;有2种能提高血清中细胞因子的含量.本研究获得了3种高效表达的重组囊素肽,动物实验结果为其作为免疫增强剂提供了实验依据.表达产物与禽流感灭活抗原联合免疫鸡只,进行免疫效果监测.
鸡 禽流感 囊素肽 重组蛋白 原核表达 免疫效果
姬向波 徐秋良 冯秀丽 陈溥言
河南牧业经济学院 郑州450016;南京农业大学动物医学院 南京210095 河南牧业经济学院 郑州450016 南京农业大学动物医学院 南京210095
国内会议
重庆
中文
88-95
2015-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）