鸡柔嫩艾美耳球虫AMA1蛋白在乳酸乳球菌中的表达
目的:探索鸡柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)子孢子顶膜抗原AMA1胞外域基因(EtAMA1)是否可以在乳酸乳球菌L.lactis NZ9000中表达,为鸡球虫病乳酸菌口服免疫奠定基础. 方法:将鸡柔嫩艾美尔球虫子孢子顶膜抗原EtAMA1克隆入原核表达载体PET-30a(+)中构建重组阳性质粒pET-30a-EtAMA1。阳性质粒经鉴定正确后转化入大肠杆菌E.coli Rosseta中筛选阳性菌,阳性菌经1.0mmol/L IPTG诱导后采用Westernblot方法检测目的蛋白表达。 结果:EtAMA1在大肠杆菌中以包涵体形式表达。多克隆抗体效价为218,Westernblot检测证实制备的抗体可与子孢子反应。重组菌pTX8048-EtAMA1/L.lactis NZ9000经nisin诱导后,采用Westernblot方法检测到约61kDa目的融合蛋白表达。 结论:顶膜抗原AMA1在顶复门寄生虫中保守。研究表明,AMA1蛋白在顶复门寄生虫入侵宿主细胞过程中具有重要作用。在顶复门虫体入侵宿主细胞过程中,AMA1参与了运动连接(MJ)的形成,MJ结构模式代表了顶复门寄生虫保守的入侵机制。
鸡柔嫩艾美尔球虫 子孢子顶膜抗原 乳酸乳球菌 基因表达
马德星 王芬 张跃 黄宇辰 张丽丽 高铭扬
东北农业大学动物医学学院,黑龙江 哈尔滨 150030
国内会议
中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会
太原
中文
52-52
2015-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)