实时荧光定量RT-PCR检测鸡钙敏感受体方法的建立
钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是G蛋白偶联受体C家族成员,其除能够调节机体钙稳态外,还可调节细胞生长、分化、凋亡、基因表达、离子通道的激活、激素的分泌等.其在动脉粥样硬化、心脏,肝脏的缺氧-复氧损伤以及缺血-再灌注损伤的研究中起到关键性作用.因此,CaSR成为当今医学研究的热点.目前,对于哺乳动物CaSR的研究较为深入,而对于禽类CaSR的研究相对较少,特别是CaSR的种属差异以及比较医学方面的研究仍是空白,主要是受到检测方法和技术的限制.本项目以21日龄CSIRO-MVS品种SPF雏鸡的心脏组织为实验材料,应用分子生物学技术,通过总mRNA提取、鸡CaSR基因扩增和纯化,并将其连接到克隆载体pMD18-T上进行PCR和基因测序鉴定,成功获得鸡CaSR阳性重组质粒,制备阳性标准品,同时对反应条件进行优化,找到最佳Tm值。本方法具有快速、灵敏、特异性强等优点,可应用于鸡CaSR mRNA表达的绝对定量检测,为进一步探究CaSR mRNA表达与缺氧-复氧损伤以及缺血-再灌注损伤引起的一系列心血管疾病的发病机制及信号转导通路的研究提供了技术支持。
鸡 钙敏感受体 基因测序 实时荧光定量分析
于志强 高雪丽 刘超男 吕晓萍 郑世民
东北农业大学动物医学学院,黑龙江,哈尔滨 150030
国内会议
中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会
太原
中文
72-72
2015-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)