鸡IL-18堆型艾美耳球虫3-1E-α-tubulin增强型核酸疫苗构建及免疫保护效果研究

摘要：

目的:为了探讨鸡球虫融合基因真核表达质粒对鸡抗球虫的免疫保护作用及鸡IL-18在鸡球虫病核酸疫苗中的免疫佐剂作用. 方法:本研究应用重叠扩增PCR(SOE PCR)技术成功地将堆型艾美耳球虫(Ea)3-1E基因和α-tubulin基因片段利用引入的柔性连接肽(G4S)3进行连接,获得融合基因3-1E-linker-α-tubulin,以PVAX1为载体成功构建融合基因的真核表达质粒PVAX1-3-1E-α-tubulin.经重组质粒体外转染BHK-21细胞并观察到阳性结果后,将重组质粒PVAX1-3-1E-α-tubulin、PVAX1-IL-18、PVAX1-3-1E-α-tubulin+PVAX1-IL-18、PVAX1-3-1E和PVAX1-α-tubulin在21和28日龄分别免疫SPF雏鸡,35日龄攻击性感染Ea5×104个孢子化卵囊. 结果:结果表明融合基因免疫组雏鸡的平均增重和相对增重极显著高于单基因免疫组,而且当有细胞因子IL-18协同免疫时,能显著减少克粪便卵囊排出数量,十二指肠病变计分减少率为71.19％,抗球虫指数为194.32. 结论:融合基因真核表达质粒的免疫保护效果明显高于单基因免疫组,免疫保护效果良好,鸡IL-18可作为核酸疫苗的一种理想的免疫佐剂.

关键词： 鸡球虫病 堆型艾美尔球虫 融合基因 真核表达质粒 免疫保护

作者: 黄小丹 李广兴 张恒 马玲 张瑞莉 马德星

作者单位: 东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会

会议地点: 太原

会议语种:中文

页码: 323-333

在线出版日期: 2015-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）