实时荧光RT-PCR快速自动化检测甲型流感病毒的研究
目的：建立一种适用于流感监控哨点医院和出入境人员对流感病毒监测的自动化实时荧光RT-PCR方法快速准确检测甲型流感病毒核酸. 方法：应用生物学软件进行多序列比对,在甲型流感病M基因的高度保守区设计引物和探针,同时针对人的RNaseP基因设计用于内部控制的引物和探针;结合核酸释放剂与纳米磁珠,在自动化样本处理仪器上,建立了一种快速、高通量检测甲型流感的方法和试剂.使用临床样本和MDCK细胞培养的毒株检测该试剂盒的特异性和灵敏度.并与市售有证试剂进行了对比,在出入境人员疾病监测点和哨点医院进行了初步的测试. 结果：检测灵敏达到0.01TCID50/ml;在25例临床阳性样本的检测上,比市售的同类试剂多检出阳性样本8例;对55例疑似甲型流感病毒患者咽拭子样本进行检测,实时荧光PCR快速诊断试剂盒与病毒分离培养鉴定法符合率100％.特异性研究表明该试剂盒对甲型流感病毒的检测具有高度的特异性,对其它病毒无交叉反应. 结论：所制备的甲型流感病毒实时荧光PCR诊断试剂和方法具有较高的灵敏度、特异性,可用于哨点医院和出入境人员甲型流感病毒的快速检测.
甲型流感病毒 实时荧光逆转录聚合酶链式反应 灵敏度 特异性检测
陈晓亮 麻祝安 刘佳 邓中平
湖南圣湘生物科技有限公司 湖南 长沙 410205 湖南省出入境检验检疫局 湖南 长沙
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2017-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）