RT-PCR和TaqMan一步法检测SCARB2转基因小鼠组织中肠道病毒71型病毒分布
目的:比较RT-PCR法和荧光定量PCR法在检测感染肠道病毒EV71的小鼠组织中的分布及含量的优缺点,建立一种可靠的检测方法. 方法:用EV71病毒株Henan1-09-China感染自主构建的SCARB2转基因小鼠,一周后,取小鼠的各组织,提取总RNA检测;从GenBank中查询2-3年流行的EV71河南株VP1区域的基因序列进行比对,设计特异引物及TaqMan探针,通过普通RT-PCR和TaqMan一步法荧光定量PCR分别对样品进行检测,比较两种方法的实际应用价值. 结果:RT-PCR不及TaqMan一步法荧光定量PCR,耗时达4-5小时,重复性较差,灵敏性低,TaqMan一步法荧光定量PCR的耗时为2-3小时,重复性好,灵敏性高. 结论:TaqMan一步法荧光定量PCR方法更适于肠道病毒EV71的快速检测.
肠道病毒71 病毒分布 聚合酶链反应
彭泽旭 周舒雅 刘甦苏 左琴 王辰飞 李保文 刘佐明 范昌发
中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,北京100050
国内会议
太原
中文
353-359
2014-08-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)