核桃EST-SSR反应体系的优化
由于SSR-PCR反应易受Taq酶、Mg2+、DNA模板、dNTPs及引物的浓度等因素影响，为此采用正交设计方法，筛选出最适宜的反应体系及扩增程序，为EST-SSR标记更好地应用于核桃遗传多样性分析、种质鉴定及分子标记辅助育种奠定良好的基础。本研究通过5因素(Taq酶、Mg2+、DNA模板、dNTPs及引物)4水平正交实验,建立了核桃EST-SSR扩增最佳反应体系(201):0.75U Taq酶、2.5mmol/L Mg2+、0.4mol/L Primer、0.3mmol/L dNTPs、20ng模板DNA、双蒸水补足201.确定了PCR适宜的退火温度为55℃,最佳循环次数为30次。
核桃 遗传育种 遗传多样性 分子标记 种质鉴定
齐建勋 朱艳 周军 吴春林 王维霞 郝艳宾
北京市农林科学院林业果树研究所,北京100093 西南林学院资源学院,昆明650224
国内会议
成都
中文
120-125
2011-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）