牛干扰素α基因的改造与可溶性表达研究
干扰素是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等功能的细胞因子，能通过多种机制抑制病毒生长，促进免疫细胞活性。牛干扰素α(Bovine interferon-α,BoIFN-α)原始基因在重组大肠杆菌中多以包涵体形式表达,为在大肠杆菌表达系统中获得可溶表达的具有活性的重组BoIFN-α,在不改变干扰素原有氨基酸组成的前提下,根据大肠杆菌密码子偏好性对BoIFN-α基因进行子优化.将优化后的BoIFN-α成熟蛋白基因分别克隆到表达载体pET-28a、PET30a和pCold Ⅱ载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.优化后的BoIFN-α基因在3种性表达量最载体均获得可溶性表达,但以在载体pCold Ⅱ中获得的可溶高.对重组菌rBoIFN-α-pCold Ⅱ/BL21的表达条件进行优化,在IPTG浓度为0.64mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高,达36mg/L菌液.重组BoIFN-α在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg.
奶牛 牛干扰素α 基因克隆 可溶性表达 疾病防控
缪德年 张弦 廖学文 张克春
上海市农业科学院,上海201106;上海市奶牛研究所,上海200436 上海市奶牛研究所,上海200436 上海市农业科学院,上海201106
国内会议
福州
中文
228-231
2015-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）