人脐带华通氏胶间充质干细胞的分离、培养、鉴定及冻存、复苏
目的:探讨从人脐带华通氏胶(Wharton”s jelly,WJ)中分离、培养、鉴定间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)及其冻存、复苏的方法. 方法:采用植块法分离、培养间充质干细胞,流式细胞仪检测P3代细胞免疫表型,鉴定其向成骨、成脂方向诱导分化的能力;将P1细胞冻存6个月后复苏,鉴定复苏后细胞的特性. 结果:植块法容易从人脐带华通氏胶中获得间充质干细胞;组织块贴壁后6天可见组织块周围细胞爬出,原代培养14～18天细胞融合70％～80％;P3代细胞强烈表达CD73、CD90、CD105,不表达CD14、CD34、CD45、CD79a和HLA-DR;成骨诱导分化后10天,可见明显钙结节;成脂诱导14天,有明显的脂滴出现,油红O染色阳性.冻存再复苏细胞活力达80％,细胞免疫表型及成骨、成脂诱导显示与冻存前细胞相同的特性. 结论:组织块培养法可从人脐带华通氏胶中分离、培养出纯度较高间充质干细胞,冻存、复苏不改变其特性.
人脐带华通氏胶 间充质干细胞 植块法 冻存方法 复苏方法
杨晓清 张沐 杨兵 张华 张玉泉
南通大学附属医院妇产科 南通大学医学院 南通226001 江苏省干细胞库 泰州225316
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349-354
2012-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）