人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的基因克隆、原核表达
目的:构建NGAL原核表达载体并表达、纯化、鉴定目的蛋白。 方法:根据GenBank报道的人NGAL基因序列,采用RT-PCR技术从人肝脏组织总RNA中获得cDNA,经PCR获得NGAL基因片段。将测序正确的目的基因克隆至pSE380载体中,连接产物转化E.coliBL21.诱导重组菌表达目的蛋白,经镍柱亲和层析法纯化并进行Westernblotting鉴定。 结果:测序结果证实克隆的目的基因序列与GenBank中的NGAL序列相符。SDS-PAGE结果显示获得分子量约为23kDa的可溶性目的蛋白,Western blotting结果显示目的蛋白可与NGAL抗体发生特异性反应。 结论:在大肠杆菌中获得了人NGAL蛋白的可溶性表达。
NGAL蛋白 免疫诊断 基因克隆 原核表达
滕昆 阳艳华 沈超 肖佳民 齐文闯 周燕娟
桂林优利特医疗电子有限公司
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贵阳
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250-253
2016-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）