基于T4DNA连接酶的microRNA电化学检测方法研究
研究结果表明,恶性肿瘤等重大疾病的发生和发展与人体内miRNA的异常表达密切相关,使之成为疾病诊断新的潜在生物学标记.但miRNA序列短、同源miRNA之间序列相似度高（1-2个碱基差别），使设计miRNA互补探针非常困难，杂交强度低，错配可能性高。因此，建立高选择性的miRNA检测方法至关重要。T4 DNA连接酶来自感染T4噬菌体的大肠杆菌，可以修补双链结构中的单链缺口，而且仅对完全互补配对的双链起作用，具有非常高的选择性。本文基于磁性微球分离技术，量子点信号放大技术及T4 DNA连接酶的高选择性，发展了一种快捷、灵敏、高选择性的miRNA电化学检测方法。将两条探针链分别修饰在CdS量子点以及磁性微珠上，并与待测miRNA杂交。若待测miRNA与探针完全匹配，在T4 DNA连接酶的作用下会使两条探针链连接，解链分离后，收集磁性微珠并进行电化学检测，即可确定待测miRNA的浓度。研究结果表明．在50 fM～30 pM浓度范围内，miR-27a的浓度与CdS量子点在Bi膜玻碳电极上的电化学响应呈现出良好线性关系，线性相关系数为0.9949，检测限为12 fM(S／N=3)。
疾病诊断 核糖核酸 电化学检测法 T4DNA连接酶 磁性微球分离技术 量子点信号放大技术
朱文远 苏星鹏 戴宗 邹小勇
桂林理工大学化学与生物工程学院 桂林 541004;中山大学化学与化学工程学院 广州 510275 中山大学化学与化学工程学院 广州 510275
国内会议
桂林
中文
87-87
2014-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）