双光子含氟分子信标用于细胞内mRNA成像
分子信标作为一种广泛使用的核酸探针在细胞内mRNA实时检测方面具有极大应用价值.传统的分子信标,因为DNA固有的负电性,自身难以进入细胞,因此需要载体,(例如纳米颗粒,阳离子聚合物,脂质体等)或者物理方法(例如显微注射和电穿孔)的辅助.而受限于DNA杂交结构的热敏感性,细胞内不同位置的温度差异也会在一定程度上影响分子信标信号的准确表达.除细胞内自发荧光的干扰。为了解决这些问题，本研究合成了一种可直接用于DNA固相合成的双光子萘酐衍生物亚磷酸酰胺合成单体，并结合本组之前报道的三氟甲基人工碱基制备了双光子激发的含氟分子信标。其中，含氟碱基作为分子信标的茎部，萘酐衍生物作为双光子荧光基团。处于配对位置的两个含氟碱基之间通过疏水作用力结合，而含氟碱基自身的强疏水性质同时还有利于分子信标与细胞膜融合，进而实现信标的自转运。双光子信号报告基团的加入则减少了生物体自发荧光的干扰，减少了光漂白和光损伤，增加了成像结果的时空分辨率，增加了组织穿透深度。这种双光子含氟分子信标可以通过成熟的DNA固相合成技术实现。实验证明，含氟分子信标可以像正常分子信标一样被信标环部的互补序列打开。荧光成像结果表明，双光子含氟分子信标可以被细胞摄取，并与目标mRNA杂交，进而给出低背景的mRNA荧光实时成像。将这种双光子含氟分子信标应用于MCF-7细胞内MnSODmRNA含量的实时检测。
信使核糖核酸 检测方法 含氟分子信标 三氟甲基人工碱基 萘酐衍生物
吕一帆 熊梦仪 张晓兵 谭蔚泓
分子科学与分子医学实验室,化学生物传感与计量学国家重点实验室,湖南大学化学化工学院,生物学院,化学与分子医学协同创新中心,湖南大学,中国长沙,410082
国内会议
成都
中文
1-2
2014-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）