基于DNA链置换酶辅助信号放大G四链体/血红素DNA酶催化化学发光检测腺苷
腺苷是一种普遍存在于人体细胞的内源性核苷,作为一种内源性小分子,在各种生物组织和器官功能的生理活性调节中起着重要的作用.特别在中枢神经系统中,它起着一个完善神经递质的调节作用,并作为对缺血性和癫痫发作引起的神经元损伤的神经保护剂.测定生物体中腺苷的含量,具有重要的意义.目前,许多新型的生物传感体系已被构建用于腺苷的检测.被构建用于腺苷的检测。化学发光分析法具有较高的灵敏度、操作便捷、仪器设备简单、分析快速、宽的线性范围和易于实现自动化等优点。本研究以核酸适体作为分子识别元件,利用聚合酶与内切酶联用构建的链置换信号放大技术,以G一四链体/血红素DNA酶催化HaOa氧化鲁米诺产生化学发光为输出信号,发展了一种简单、灵敏、高选择性的化学发光传感新方法,并应用于腺苷的分析。本研究所建立的方法不需要对相关核酸进行化学修饰,整个检测过程都是在均相溶液中进行,无需洗涤和分离过程,操作简单。此外,该方法还具有较高的选择性和较宽的线性范围,并已成功应用于人血清样品分析。在优化的条件下,对一系列不同浓度的腺苷进行检测。实验结果如图所示。在425 nm处的化学发光强度随目标腺苷的浓度增加而增加,化学发光强度值与腺苷在1.0X10-6—2.0X10-4mol/L浓度范围内的对数值之间存在良好的线性关系,线性方程为△I=76.88461gC+15.6146,相关系数为R=0.9948。检测限为5.0X10-7mol/L。
腺苷检测 链置换信号放大技术 化学发光技术
李梅 张亮亮 楮志丹 赵书林
广西师范大学,桂林541004
国内会议
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2014-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)