硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞放射损伤的防护作用
目的:探讨硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)细胞经60Co γ-射线照射后细胞增殖、周期、调亡的影响,并分析其可能的机制.同时观察硫酸镁对胶质瘤U251细胞照射后细胞周期、凋亡的影响.研究结果为硫酸镁的临床应用提供实验依据和支撑. 方法:1、取对数生长期的HUVEC细胞,采用CCK-8法检测硫酸镁对细胞存活率及增殖的影响,筛选合适浓度的硫酸镁.用流式细胞仪检测细胞周期分布和Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况.2、用NO试剂盒和SOD试剂盒分别测定NO含量和SOD活性，硫代巴比妥酸法( thiobarbituric acid,TBA)测定丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量变化。3、Real-Time PCR方法检测ICAM-1 mRNA、NF-K B mRNA表达。4、不同浓度的硫酸镁预处理对数生长期的脑胶质瘤U251细胞，经γ-射线照射后不同时间点收集细胞，采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率的变化。5、数据分析采用SAS8.0统计软件包，采用均数±标准差表示，组间差异进行方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。 结果：l、CCK-8检测结果显示：在1.25mg/m1～6.25mg/ml浓度范围内硫酸镁对HUVEC细胞无毒性，其中6.25mg/ml硫酸镁对γ-射线照射或非照射的细胞增殖皆无影响，而大于6.25mg/ml的硫酸镁对照射或非照射的HUVEC细胞皆有不同程度的增殖抑制作用。2、6.25mg/ml及大于6.25mg/ml硫酸镁能不同程度的缓解HUVEC细胞经照射后产生的G2/M期阻滞。照射组细胞凋亡率较空白对照组均有不同程度的增加，但48h时，6.25mg/ml、12.5mg/ml硫酸镁处理组HUVEC细胞凋亡率较24h有所恢复，说明硫酸镁能缓解HUVEC细胞凋亡。3、HVEC细胞经γ射线照射后，在不同的时间点收集细胞，细胞内NO含量、MDA含量增加，SOD活性降低，较空白对照组皆有统计学差异(p<0.05)。6.25mg/ml硫酸镁能提高细胞内SOD活性，降低细胞自由基水平。4．Real-Time PCR结果显示，γ-射线能增加细胞内ICAM-lmRNA、NF-K BmRNA的表达，6.25mg/ml硫酸镁能在一定程度上降低二者的表达水平。5、6.25mg/ml、12.5mg/ml的硫酸镁能增加胶质瘤U251细胞照射后12h、24h时的凋亡率。 结论：1、低浓度的硫酸镁对HUVEC细胞无毒性，较高浓度的硫酸镁对HUVEC细胞增殖具有抑制作用。2、硫酸镁能缓解HUVEC细胞γ射线照射后G2/M阻滞、细胞凋亡。3、硫酸镁保护HUVEC细胞辐射损伤的机制可能是通过降低ICAM-lmRNA、NF-KBmRNA表达而实现。4、硫酸镁能不同程度的增加受照后胶质瘤U251细胞的凋亡，提高U251细胞辐射敏感性。
硫酸镁 放射损伤 人脐静脉血管内皮细胞 辐射防护 分子机制
封士成 崔凤梅 涂彧
苏州大学放射医学与防护学院
国内会议
苏州
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206-207
2014-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）