来源于Symbiobacterium therophilum的内消旋2-氨基庚二酸脱氢酶中Y76对辅酶偏好性影响研究
氨基酸脱氢酶有严格的手性选择性,野生型酶多为L-选择性,已被用于L-氨基酸的合成;已知的D-氨基酸脱氢酶多为膜蛋白,不能被用于工业生产,仅有内消旋-2,6-二氨基庚二酸脱氢酶(meso-2,6-D-diaminopimelic acid dehydrogenase)(DAPDH)(EC1.4.1.16)及变体可用来进行D-氨基酸的生物合成.在辅酶偏好性方面,已知的DAPDH酶及突变子的辅酶偏好性均为NADP(H).脱氢酶在实际应用中都更倾向于用NAD(H)做循环体系。将氨基酸脱氢酶直接还原氨化生产D-氨基酸的方法向实际应用靠近的过程中，需要有NAD(H)依赖型的DAPDH。文章对Y76位是否对辅酶偏好性有影响进行了摸索，此外，对和与辅酶NADP+上磷酸基团有直接作用的R35/R36位也进行了偏好性改造摸索，并和Y76的部分突变子进行了组合突变测试。为研究Y76是否会影响辅酶的偏好性，对其进行了一些定点突变尝试，发现突变子对两种辅酶的偏好性都发生了变化，还尝试构建了R35S/R36V突变子，并和Y76突变子中的一些进行了组合，结果发现R35/R36和76位点组合后对辅酶偏好性有协同影响作用。
内消旋2-氨基庚二酸脱氢酶 D-氨基酸脱氢酶 酪氨酸 NAD(H)辅酶 偏好性
赵雷明 刘卫东 陈曦 冯进辉 王敏 吴洽庆 朱敦明
天津科技大学生物工程学院,教育部工业发酵微生物重点实验室,天津 300457;中国科学院天津工业生物技术研究所 工业酶国家工程实验室 天津市生物催化技术工程中心,天津 300308 中国科学院天津工业生物技术研究所 工业酶国家工程实验室 天津市生物催化技术工程中心,天津 300308 天津科技大学生物工程学院,教育部工业发酵微生物重点实验室,天津 300457
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2014-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）