透明颤菌血红蛋白基因的表达对Bacillus subtilis NX-2发酵生产γ-聚谷氨酸的影响
γ-聚谷氨酸（γ-PGA）是由微生物合成的细胞外氨基酸聚合物，由D型和L型一谷氨酸通过γ-酞胺键连接而成。具有保湿性和可生物降解等许多优良的理化和生物学特性，在环境、医药、食品和化妆品等领域具有广泛的应用前景，是不可降解的合成高分子材料(如塑料和水凝胶等)优良的替代品，因此，开发该产品有利于加快我国高分子产业和产品结构向绿色化和功能化的方向发展。利用重叠PCR方法将枯草芽孢杆菌(B.subtilis)P43启动子与透明颤菌血红蛋白基因vgb基因连接,构建至大肠杆菌—枯草芽孢杆菌穿梭质粒pMA5,得到重组质粒载体pMA5-P43-vgb,并将其转化B.subtilis NX-2,从而获得重组菌B.subtilis NX-2(vgb+).SDS-PAGE检测发现血红蛋白VHb在重组菌中表达的目的蛋白大小为16 kDa,另外,一氧化碳差光光谱结果验证B.subtilis NX-2(vgb+)表达了具有生理活性的血红蛋白.在7.5L发酵罐上对重组菌B.subtilis NX-2(vgb+)进行发酵实验,结果显示重组菌比出发菌的生物量提高了41.2％,γ-PGA的产量提高了7.5％.该研究为γ-PGA的进一步工业化生产奠定了基础.
生物高分子 γ-聚谷氨酸 枯草芽孢杆菌NX-2 发酵工艺 透明颤菌血红蛋白基因 基因表达
许宗奇 汤宝 冯小海 李莎 徐虹
南京工业大学 生物与制药工程学院,江苏、南京 210009
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2014-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）