辣椒SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选
以辣椒青皮大椒基因组DNA为模板,采用L25(65)正交试验设计和单因素随机试验设计,对SRAP反应体系中的6种关键因素(退火温度、TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进行优化,三次重复.结果表明,辣椒SRAP-PCR最佳反应体系为:退火温度37℃,Taq DNA聚合酶1.25 U,Mg2+2mM、dNTPs0.3 mM,引物0.5 mM,模板DNA100 ng.μL-1,总体积为20 μL,且体系稳定.运用该体系对父本为辣椒青皮大椒、母本为泡椒以及杂交F1进行SRAP引物筛选,从768对合成SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富、条带稳定的303对引物组合.该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒分子遗传学中的应用提供可靠的科学依据.
辣椒 分子遗传学 序列相关扩增多态性标记 聚合酶链反应
张佳琦
广东海洋大学,湛江524000
国内会议
广州
中文
64-69
2013-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）