MDV致瘤基因MEQ真核表达载体的构建及对CEF细胞MMR相关基因表达的影响

摘要：

MEQ基因是马立克氏病病毒血清l型特异性基因,为了研究MEQ基因的致瘤机理,本研究构建了MEQ基因的真核表达载体.首先采用TA克隆将MEQ基因片段连接pMD19-T Vector质粒,构建成pMD19-T-meq质粒,然后采用EcoRI、XhoI限制性内切酶双酶切将MEQ基因克隆至pVAX-1真核表达质粒,构建pVAX-1-meq真核表达质粒.提取pVAX-1-meq质粒转染至鸡胚成纤维细胞中,转染后提取贴壁细胞中总RNA,以β-actin作为内参采用real-time PCR检测MEQ基因、错配修复相关基因、p53基因的mRNA的表达情况.结果本试验成功构建出pVAX1-meq真核表达载体,并在鸡胚成纤维细胞中成功表达.MEQ基因转染的鸡胚成纤维细胞中错配修复相关基因(MSH2和MLH1基因)、p53基因的mRNA表达量显著上调.表明MDV感染造成宿主DNA损伤后,MEQ基因影响DNA损伤修复相关基因的表达,干扰宿主对损伤的DNA进行修复,导致MD肿瘤的形成.

关键词： 鸡马立克氏病病毒 MEQ基因 鸡胚成纤维细胞 真核表达 错配修复

作者: 周鑫 占力 杨德吉 姚大伟

作者单位: 南京农业大学动物医学院,江苏南京210095

会议类型: 国内会议

会议名称: 2015年中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第九届会员代表大会暨第21次学术研讨会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 303-310

在线出版日期: 2015-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）