猪血凝性脑脊髓炎病毒S蛋白受体结合域的初步筛选与鉴定

摘要：

目的：实验旨在通过分子生物学实验方法，筛选出猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)S蛋白RBD，为后续研究PHEV分子致病机制的研究奠定基础。 材料方法：本实验通过应用现代生物信息学对HEVS蛋白进行生物信息学推测，预测S蛋白的各项理化性质和二级结构。根据推测出的生物学信息结果将S蛋白S1功能域分为三段基因片段，分别编码291个aa、319个aa和516个aa。包含了所有可能成为受体结合位点的区域，并将三段目的片段分别与pGEX-4T-1线性化原核表达载体连接，构建重组表达载体。 结果：在体外成功的获得了原核大肠杆菌细胞诱导表达的目的蛋白并对其进行纯化，将纯化后的三段重组蛋白将分别与PK-15细胞进行结合试验，同时与PK-15细胞总蛋白进行GST-Pull down实验，以期筛选出能与细胞结合的重组蛋白。 结论：本研究中，选用了pGEX原核表达载体系统，此系统具有高表达效率，通过体外表达已经成功获得三段分泌型表达蛋白，经生物信息学分析基本包含了可能成为RBD的全部结合位点区域。这些蛋白的获得，有助于PHEV的RBD筛选鉴定的顺利进行。

关键词： 猪血凝性脑脊髓炎病毒 S蛋白 受体结合域 致病机制

作者: 董波 高丰 贺文琦 赵魁 成军

作者单位: 吉林大学,吉林长春130062

会议类型: 国内会议

会议名称: 2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 76-76

在线出版日期: 2012-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）