用噬菌体展示技术筛选布鲁氏菌侵染巨噬细胞过程中与OMP25作用的受体
利用噬菌体展示技术进行多肽筛选的实质是一个蛋白互作的过程,1990年McCafferty等报道了用噬菌体展示技术筛选溶菌酶单链抗体的方法,使得这项技术被更加广泛的应用.本实验利用噬菌体展示技术筛选出42株阳性环7肽噬菌体,对其DNA序列进行Basic BLAST、DNAMAN及NCBI protein blast分析筛选出与布鲁氏菌OMP25蛋白亲和结合很强的5个多肽和一个潜在的OMP25蛋白结合受体,为寻找与OMP25蛋白有效结合的受体及靶位点奠定了理论依据,为阐明布鲁氏菌侵染巨噬细胞的分子机制提高科学依据,寻找新的药物治疗靶标. 通过对布鲁氏菌逃避巨噬细胞的杀伤作用的报道，实验已经证明omp25抑制肿瘤坏死因子的产生，在布鲁氏菌侵染巨噬细胞的过程中。同时omp25是一种外分泌型的外膜蛋白，存在于布鲁氏菌的培养基中，这也是被证明过的。因此，推测在巨噬细胞的膜上可能有一个受体与omp25结合导致肿瘤坏因子的产生被抑制。通过用噬菌体展示技术筛选出与omp25亲和力较强的多肽，在通过基因库中blast比对，找出巨噬细胞上的膜蛋白，这个蛋白可能就是存在于巨噬细胞上的omp25的受体。实验证明了这个受体蛋白的存在。
布鲁氏菌 巨噬细胞 OMP25蛋白 受体筛选 用噬菌体展示技术
黄小强 赵敏 王少伟 张燃 刘瑞田 盛金良 王鹏雁 陈创夫
石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003
国内会议
2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会
北京
中文
114-114
2012-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）