基于TaqMan探针的牛布氏杆菌实时荧光定量PCR的特异性鉴定
目的:牛布氏杆菌病(布病)是一种由布氏杆菌引起的人畜共患传染病,世界动物卫生组织(OIE)列为B类传染病,是国际贸易检疫中必检的传染病,我国将它列为B类传染病.加强牛布氏杆菌病检测,扑杀阳性牛是控制牛布氏杆菌病的关键措施之一. 方法：本研究选取高度保守的布氏杆菌属特异性的BM28基因序列，利用Primer Express 3.0软件进行引物和探针的设计。 结果：5个稀释度的范围内定量PCR有S型扩增曲线，符合定量PCR的Ct值与起始拷贝数之间严格的线性关系。通过对扩增曲线的分析，检测的R2值达到0.999。因此，标准曲线在5.O×105拷贝～5.O×l01拷贝每微升范围内呈现良好的线性关系，表明本实验绘制的标准曲线可以达到试验要求。 结论：实时荧光定量PCR检测方法是近年来应用较为普遍的一种快速检测方法，具有快速、准确的优点，适用于出入境动物产品的快速检测和排查。本研究从引物探针设计、模板纯化，PCR程序设计等方面进行了优化，建立了较为完善牛布氏杆菌病的鉴定检测方法，对布氏杆菌病的普查监测，以及进出口活动物及其产品的检验检疫具有重要的意义。
牛布氏杆菌病 实时荧光聚合酶链反应 特异性鉴定 荧光探针
张太翔 凌宗帅 赵立娜 孙涛 徐彪 梁成珠 刘文鹏 孙军 张艺兵
潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041 济南出入境检验检疫局, 山东济南,250010 山东检验检疫局,山东青岛,250023
国内会议
2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会
北京
中文
132-132
2012-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）