会议专题

钌红染色观察猪链球菌荚膜超微结构研究

荚膜是某些细菌的特殊结构,具有黏附、抗吞噬作用,与细菌的致病性有关,在细菌的鉴定中有重要意义.猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是猪的重要致病菌,可以引起脑膜炎、败血症、心内膜炎、关节炎、肺炎等疾病,也可导致生猪从业人员感染和死亡.根据其荚膜抗原的不同,猪链球菌分为33个血清型。钌红可作为电镜组织学用着色剂,与戊二醛一同使用进行黏多糖染色,与四氧化锇一同使用增加对比度,清晰标记细菌荚膜超微结构。本研究探讨钌红染色方法是否能用于观察猪链球菌荚膜的超微结构。电镜下猪链球菌呈圆形或卵圆形,单个或呈链状排列。细胞内核质呈丝状,核糖体散在分布。细胞壁完整,与细胞质膜结合紧密。细胞表面包被一层荚膜,荚膜厚而肥大,呈网状,电子致密度高。大多数细菌的荚膜是多糖,钌红是多聚阳离子染料,具有与多聚阳离子聚合物如酸性多糖反应的特异性。Luft首次把钌红用于电镜下观察多聚糖结构。电镜超薄切片所使用的常规固定方法不能有效地保存细菌的荚膜成分,这是因为荚膜成分高度亲水,在脱水和包埋过程中其结构会发生崩解。在戊二醛固定过程加入赖氨酸能改善对细菌荚膜的保护。赖氨酸与戊二醛反应时能形成大的聚合物。大多数胺在生理pH下带正电荷,这样的集合物能够与细菌荚膜内带负电的点形成交联。不同长度的横桥提供了非常有效的交联,因此在随后的脱水过程中提高荚膜成分的稳定性。结果显示,使用钌红染色和戊二醛-赖氨酸固定方法适于观察猪链球菌荚膜结构,为研究猪链球菌的致病机制提供了技术基础。

猪链球菌 荚膜 超微结构 钌红染色法

吴小红 郝淮杰 李豫川 严格 田光 姜永强

军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室 北京 100071

国内会议

第九届全国生物医学体视学学术会议、第十二届全军军事病理学学术会议暨第八届全军定量病理学学术会议

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253-254

2014-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)