传染性法氏囊病病毒VP3基因在昆虫细胞中的表达及其ELISA抗原反应性分析
本文为分析传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组VP3蛋白的ELISA抗原反应性,将IBDV vp3基因插入杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHTA中,构建重组供体质粒pFastBacHTA-vp3并转化E.coli DH10Bac感受态细菌,经抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac-vp3.用pBac-vp3转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒vBac-vp3.对重组杆状病毒感染的Sf9细胞,用Weatern blot检测,在33ku处存在一条特异的蛋白条带;用间接免疫荧光(IFA)检测可见特异性荧光.以纯化的重组VP3蛋白为包被抗原建立IBDV抗体间接ELISA检测方法(VP3-ELISA),并与重组VP2蛋白包被抗原建立的VP2-ELISA和全病毒抗原ELISA (IDEXX-ELISA)比较,对42份不同鸡血清中的IBDV抗体进行检测,VP3-ELISA对阴阳性血清的区分度低于VP2-ELISA和IDEXX-ELISA;VP3-ELISA阳性检出率低于VP2-ELISA和IDEXX-ELISA;VP3-ELISA与IDEXX-ELISA的相关系数低于VP2-ELISA与IDEXX-ELISA的相关系数.本研究结果表明,在昆虫细胞中表达的重组VP3蛋白具有良好的特异性和抗原反应性,其ELISA抗原反应性弱于重组VP2蛋白和IBDV全病毒抗原.
传染性法氏囊病病毒 VP3基因 细胞表达 酶联免疫吸附测定 抗原反应性
刘华洁 王永山 杜希宁 梅永杰 王晓丽 欧阳伟 毕振威 潘群兴 姚火春
江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014;南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095 江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014 江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014;南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210046 南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095
国内会议
济南
中文
174-180
2015-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）