不同毒力表型EV71 VP1氨基酸变异的研究

摘要：

目的：前期从临床患者分离得到6株肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71),4株接种小鼠后致使动物后肢麻痹并死亡(重株),2株接种后仅引起轻微症状最终痊愈(轻株),测序显示两组病毒编码区内存在8处氨基酸的变异.本实验选取位于VP1上的变异位点(P639 S/G),构建突变体拯救病毒,比较病毒突变前后在细胞上的复制差异. 方法：利用反向遗传学手段,在EV71感染性全长cDNA的基础上构建突变体病毒的全长感染性cDNA,转染获得拯救病毒并传代验证;病毒全基因测序、RT-PCR、蛋白免疫印迹、免疫荧光检测拯救病毒;绘制拯救病毒的生长曲线. 结果：RT-PCR检测到EV71 VP1特异性核酸片段;蛋白免疫印迹、免疫荧光检测到EV71特异蛋白;突变前后拯救病毒的生长曲线没有发生明显改变. 结论：突变体病毒拯救成功且能稳定传代;EV71-P639变异不影响病毒的复制.

关键词： 肠道病毒71型 氨基酸变异 VP1蛋白 反向遗传学

作者: 张亚杰 李鹏 岳盈盈 宋楠楠 李冰清 李志会 秦立增 孟红

作者单位: 山东省医学科学院基础医学研究所,山东济南250062;济南大学 山东省医学科学院基础医学研究所,山东济南250062

会议类型: 国内会议

会议名称: 世界中医药学会联合会中医药抗病毒研究专业委员会第一届学术年会

会议地点: 烟台

会议语种:中文

页码: 167-175

在线出版日期: 2015-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）