人源单核细胞系28SC体外检测热原的可行性研究
目的:研究人源单核细胞系28SC体外检测热原的可行性. 方法:用28SC与浓度为0、10、100ng/ml的活化物calcitriol孵育48小时,将活化后的28SC与各类热原”革兰氏阴性菌(细菌内毒素LPS);革兰氏阳性菌(脂磷壁酸,LTA);真菌(酵母多糖,Zysoman)”共同孵育18～22 h孵育,以酶联免疫分析(ELISA)法检测孵育体系中相关细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的含量变化,建立28SC体外热原物质LPS检测体系. 结果:①以家兔法模拟人体反应条件，确定热原物质LPS, LTA, Zysoman引起家兔体温升高0.6℃的最小浓度分别为0.5EU/ml,0.5μg/ml,16μg/ml。当活化物calcitriol浓度为。和10ng/ml时，28SC-IL-1β, IL-6, TNF-a法不能模拟人体反应;calcitriol浓度为100ng/ml浓度时，28SC-IL-1β, TNF-a法不能模拟人体反应;28SC-IL-6法对LPS可检测到0.25EU/ml，对LTA可检测到0.5μg/ml，对Zymosan可检测到16.0μg/ml;确定28SC体外热原检测体系为:calcitriol浓度为100ng/ml，检测指标为细胞因子IL-6;②使用不同浓度的LPS刺激calcitriol活化后的28SC细胞，最低检测限可达到0.031 EU/ml，线性范围为0-0.5EU/mlR=0.9540;③比较了15代和45代28SC对于检测LPS的结果，45代28SC各剂量组与15代细胞相应剂量组之间IL-b含量无显著性差异，最低检测限均可达到0.031 EU/ml，R15=0.9942，R45=0.9928。 结论:确立28SC热原检测体系;以calcitriol (100ng/ml)为活化物，以细胞因子IL-6为检测指标，对LPS的最低检测限可达到0.031 EU/ml，线性范围为0-0.5EU/mlR=0.9540;该体系稳定性好，在45代内有较好的热原检测活性。
实验室检测 体外热源物质 人源单核细胞系 可行性分析
吴彦霖 刘倩 秦媛媛 张媛 高华
中国食品药品检定研究院,药理室,北京100050
国内会议
中国药理学会安全药理学专业委员会成立大会暨第四届安全药理学国际学术研讨会
广州
中文
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2015-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）