Narf影响细胞增殖、周期及DNA损伤修复功能的初步研究
目的：核纤层蛋白A(laminA)基因LMNA缺失或表达异常跟衰老密切相关.LMNA缺失能导致laminA前体识别因子Narf(nuclear prelamin A recognition factor, Narf)的表达量明显降低.为揭示其中的分子机理,拟通过高表达或低表达Narf,探讨其在细胞增殖、细胞周期及DNA损伤修复方面的功能,判断是否参与细胞衰老进程. 方法：构建了稳定过表达或沉默Narf的细胞株。采用CCK-8法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞周期，Western blotting检测周期相关蛋白CDK2的表达水平，运用Western blotting技术检测H2O2处理与未处理的Narf过表达或沉默细胞中H2AX,γ-H2AX,P53,P-P53,53BP1及PML的表达水平。 结果：Narfi过表达促进细胞的增殖，沉默对细胞的增殖没有明显影响。Narf过表达使更多细胞处于S期，CDK2水平上调，沉默对细胞周期无影响，同时CDK2水平不变。P-P53和53BP1蛋白水平随Narf韵上调而表达升高。Narf高表达细胞中，H2O2处理使γ-H2AX, P53也上调，H2AX, PML蛋白水平则不变。而在Narf低表达情况下仅γ-H2AX蛋白水平下调，其他蛋白水平不变。 结论：Narf过表达促进细胞的增殖，使细胞更快地从G1期过度到S期，可能与CDK2水平上调相关。Narf沉默对细胞增殖和周期没有影响。Narfa可以影响细胞中γ-H2AX, P53, P-P53, 53BP1的表达，通过这些蛋白的作用途径影响DNA的损伤修复。结果表明Narf表达上的变化对细胞有比较广泛的影响，可能参与到LMNA基因缺失或prelaminA加工异常导致的早老途径。
细胞增殖 细胞周期 脱氧核糖核酸 损伤修复功能 核纤层蛋白A前体识别因子
陈维春 黄国滨 吴伯艳 袁源 郑慧玲 刘新光
广东医学院衰老研究所,东莞523808 广东省医学分子诊断重点实验室,东莞523808
国内会议
第五届中国衰老与抗衰老学术大会暨第四届全国老年基础与转化医学论坛
深圳
中文
31-31
2015-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）