基于Bcl-2的抗干眼症药物高通量筛选体系的建立
本文建立了基于Bcl-2的抗干眼症药物高通量筛选体系,为干眼症防治药物的研究提供一个理想的技术平台.首先建立了含有SV40弱启动子、3×p53 binding site(p53BS)基序、不稳定型墨绿色荧光蛋白ZsGreen1-DR基因片段的报告质粒p3p53BS-ZsGreen1DR.将其转染大鼠泪腺上皮细胞(LGEC),G418筛选后获得了p53反应性报告细胞株LGEC-ZsGreen1DR,即基于Bcl-2的抗干眼症药物高通量筛选体系.p53诱导表达实验结果表明,该加入P53前及加入P53在0 h时,LGEC-ZsGreen1DR表达荧光的平均光密度为0.010±0.003;加入P53在4 h时LGEC-ZsGreen1DR的平均光密度为0.134±0.023;在12 h达到高峰,平均光密度为0.401±0.124;在24h时细胞平均光密度明显下降,平均光密度为0.149±0.045.将LGEC-ZsGreen1DR细胞株冻存30天,复苏并传代培养1个月,加入P53在0 h时,LGEC-ZsGreen1DR表达荧光的平均光密度为0.007±0.001;加P53诱导4 h后LGEC-ZsGreen1DR的平均光密度为0.144±0.052;12 h时的平均光密度为0.387±0.084;24h时的平均光密度为0.188±0.034;说明LGEC-ZsGreen1DR细胞株经冻存、复苏、传代后仍能有效反映P53的诱导作用.
干眼症 抗干眼症药物 B淋巴细胞瘤-2 高通量筛选体系
姚小磊 彭俊 彭清华
湖南中医药大学第一附属医院眼科学重点学科,湖南长沙410007
国内会议
北京
中文
148-162
2015-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）