类球红细菌生产辅酶Q10的基因改造

摘要：

辅酶Q10是一种强烈的抗氧化剂,具有延缓衰老、治疗帕金森综合症以及保护心脏等功效,广泛用于化妆品和保健品市场.本文利用DNA重组技术对辅酶Q10产生菌Rhodobacter sphaeroides进行分子育种改造.首先克隆得到R.sphaeroides 2.4.1的crtB基因上下游各2.5kb左右的同源交换臂crtBup和crtBdw,以及Escherichia coli DH5α的ubiC-ubiA连锁基因.利用pSUP202自杀性载体，成功的构建出了带有同源双臂、ubiC-ubiA基因和壮观霉素抗性基因的敲除载体pCIM22。利用接合转移技术，将pCIM22导入R.sphaeroides 2.4.1,通过松弛培养筛选双交换，成功获得带有外源ubic-ubia基因和Spectinomycin抗性的突变株R.sphaeroides Dana。通过R.sphaeroides Dana的RT-PCR实验等方法，证实了外源基因ubiC-ubiA在R.sphaeroides Dana中的成功转录。发酵24h后，利用HPLC测定R.sphaeroides 2.4.1和R.sphaeroides Dana的辅酶Q10产量，结果表明突变株辅酶Q10产量较出发菌株提高了75.29％。

关键词： 类球红细菌 辅酶Q10 crtB基因 分子育种改造

作者: 林丹枫 李力 江贤章 郑毅 吴松刚 黄建忠

作者单位: 工业微生物发酵技术国家地方联合工程研究中心(福建师范大学)

会议类型: 国内会议

会议名称: 华东六省一市生物化学与分子生物学学会2014年学术交流大会暨浙江省第十一届学会会员代表大会

会议地点: 浙江温州

会议语种:中文

页码: 16-16

在线出版日期: 2014-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）