枯草芽孢杆菌NCD-2电击转化条件的优化
本实验主要针对可能影响NCD-2菌株转化的条件(如菌株的电场强度、电阻值和质粒类型)进行优化,以期获得NCD-2菌株的高效电击转化体系。通过设置不同的培养时间(3-4.5h),不同电压(12.0-14.5 kV/cm)和不同电阻(200Ω,400Ω)。结果发现,NCD-2菌株按1:30比例转接到生长培养基中,37℃,150 rpm培养3.5 h,电场强度14.0 kV/cm,电阻200。的条件下,NCD-2菌株的电击转化效率最高(对质粒pNW33n的转化效率达到3.8x104转化子/pg DNA )。在优化条件下,又测试了5个不同大小并带有不同复制子的质粒对NCD-2菌株的转化效率,结果表明,不同质粒的转化效率依次为:pNW33n(4.21 kb, B. coagulans来源复制子),pAD123 (5.95 kb, B.subtilis来源复制子),pHY300PLK04.87 kb, Streptococcus faecalis来源复制子),pMK3 (7.21 kb, Staphyloccocus aureus来源复制子),pHV 1249 (9.09 kb, Staphyloccocus aureu来源复制子)。由此可见,影响质粒转化效率的主要因素是其所携带复制子的来源,其次可能是质粒的大小。
棉花黄萎病 枯草芽孢杆菌 电击转化 电场强度 电阻值 质粒类型
王培培 郭庆港 李社增 鹿秀云 李宝庆 马平
河北农业大学植物保护学院,保定071000;河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定071000 河北省农林科学院植物保护研究所,河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心,保定071000
国内会议
厦门
中文
705-705
2010-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)