用泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-1 0RF4蛋白抗血清测定几种植原体的血清学关系
植原体(phytoplasma)是一类无细胞壁的原核微生物,属柔膜菌纲(Mollicutes),寄生于植物韧皮部筛管内,主要由叶蝉等刺吸式昆虫传播.目前国际上对植原体鉴定分类的重要依据是保守基因16SrDNA.Lee等(2000)和Wei等(2007)根据16SrDNA的PCR产物限制性酶切片段长度多态性(RFLP)将植原体分为14个组,泡桐丛枝植原体被划分于16SrⅠ组,即翠菊黄化植原体组.Lin等(2009)从泡桐丛枝植原体南阳株系中克隆到两个质粒pPaWBNy-1和pPaWBNy-2,其中对pPaWBNy-1 ORF4编码的蛋白进行了原核表达并制备抗血清.本实验以感染植原体的丛枝泡桐和健康植物材料为对照，应用pPaWBNy-1 ORF4蛋白抗血清分别对16SrⅠ组长春花绿变植原体及其他组的植原体如板栗黄化皱缩植原体(16SrXIX),枣疯病植原体(16SrV)、樱桃致死黄化植原体(16SrV)进行Western blot检测和间接免疫荧光显微镜观察。Western blot结果表明，在从枝泡桐中检测到大小为34kDa的特异性目的条带，并在丛枝泡桐和健康泡桐中都检测到一条90kDa较弱的非特异性条带;而在海南绿变长春花植株中检测到两条分别为49kDa和45kDa，且明显比泡桐丛枝弱的条带，在枣疯病材料中检测到45kDa很弱的非特异性条带;板栗黄化皱缩、樱桃致死黄化和其他健康材料中没有检测到任何条带。在间接免疫荧光显微镜检测中，除丛枝泡桐切片外，其余材料在韧皮部均无荧光亮斑出现。
泡桐丛枝植原体 原核表达载体 蛋白结构蛋白 血清学
宋传生 林彩丽 田国忠 赵文军 朱水芳 胡佳续 牟海青
中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,国家林业局森林保护学重点实验室,北京 100091 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所,北京 100029
国内会议
厦门
中文
294-294
2010-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）