东北梅花鹿鹿茸尖端组织全长cDNA文库的构建
为克隆出与鹿茸生长发育相关基因的全长序列,采用SMART技术构建了东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库.用SV Total RNA Isolation System试剂盒提取总RNA,以逆转录酶PowerScriptTM反转录合成第一链cDNA,然后通过LD-PCR合成并扩增ds cDNA.扩增产物经纯化、Sfi I酶切、过CHROMASPIN-400柱去除小片段后,连接到Sfi I消化过的pDNR-LIB质粒载体中,最后用电转化法将重组质粒转化到E.coli DH5 α内得到原始文库.经测定,构建的原始文库约含有2.56×106个重组子,插入片段多在0.5 ～2 kb之间,平均插入片段长度约1.1 kb,重组效率接近100％.结果表明,东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库已构建成功.
梅花鹿 鹿茸尖端组织 全长cDNA文库 SMART技术
郝丽 李和平 严历
东北林业大学野生动物资源学院 哈尔滨150040
国内会议
包头
中文
250-253
2010-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）