代尔夫特菌MTQ3拮抗相关基因tetR的克隆及功能验证

摘要：

本实验,以MTQ3为受体菌,以E.coli DH5α(pRL1063a)为供体菌,E.coli DH5α(pRK2 013)为辅助菌,进行三亲本杂交,建立了Tn5随机插入突变库.采用影印法对突变株进行拮抗性能的筛选,从MTQ3的突变体库中筛选到23个抑菌圈变大的突变株,4个抑菌圈变小的突变株,1个拮抗能力完全消失的突变株MTQ3-ΔT.根据转座子Tn5-1063上的luxA序列设计引物,以转座子插入突变株总DNA为模板,PCR扩增luxA序列.结果证实,Tn5-1063插入到MTQ3基因组中.对MTQ3-ΔT进行16S rDNA测序验证,其序列与MTQ3的16S rDNA序列完全一致.用TAIL-PCR(Thermal asymmetric inter laced PCR)方法,从突变株MTQ3-ΔT中克隆获得了转座子左侧翼序列,经比对为tetR基因的下游序列.本实验所得到的tetR基因全长666bp，产物为含有223个氨基酸的TetR蛋白，属于转录调控TetR家族。其与己知基因组全序列的Delftia acidovoransSPH-1及Delftia sp. Csl-4中tetR基因的相似性均为93％，蛋白序列相似性分别为95%和96%。

关键词： 代尔夫特菌 拮抗能力 tetR基因 表达机制

作者: 彭爱琴 郭海萌 侯启会 汪城墙 刘凯 丁延芹 杜秉海

作者单位: 山东农业大学生命科学学院,山东省农业微生物重点实验室,山东泰安 271018

会议类型: 国内会议

会议名称: 第十二届全国土壤微生物学术研讨会暨第五届全国微生物肥料生产技术研讨会

会议地点: 武汉

会议语种:中文

页码: 115-116

在线出版日期: 2014-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）