RT-PCR检测兔出血症病毒方法的建立及应用
目的：建立能快速、特异、敏感的检测并临床应用的兔出血热病毒RT-PCR方法.方法：根据GenBank公布的RHDV序列,设计了3条引物,对引物组合进行了筛选,优化PCR体系各反应条件,测定该方法的敏感性与特异性,并进行临床应用对比实验.结果：筛选出的引物组合能够特异性扩增331bp产物,Mg2+离子浓度在1.0～1.5mmol/L扩增效果最好,退火温度在50～60℃之间扩增无差异性;该方法可以扩增102拷贝以上的模板,对兔轮状病毒与水泡性口炎病毒检测结果均为阴性;临床应用对比实验显示,该方法自27份临床采集样本较HA方法多检出3例RHDV阳性样本,检出阳性率由66.7％提升至77.8％.结论：本研究建立的RT-PCR诊断方法具有特异、灵敏、快速等特点,能够用于该病的临床检测,为防控该病提供了技术保障.
兔出血症 反转录聚合酶链式反应 临床诊断 流行病学
肖跃强 刘吉山 杨慧 沈志强
山东省滨州畜牧兽医研究院,滨州 256600;山东绿都生物科技有限公司,滨州 256600
国内会议
四川德阳
中文
88-92
2014-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）