LIM矿化蛋白-1对间充质干细胞成骨分化影响的实验研究
目的:通过构建LIM矿化蛋白-1(Lim mineralization protein-1,LMP-1)的真核表达质粒,并在兔骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)内表达,研究LMP-1对体外培养BMSCs成骨分化的影响. 方法:RT-PCR克隆LMP-1和BMP-2,并构建plRES2-EGFP-LMP1及pIRES2-EGFP-BMP2重组质粒.分离培养BMSCs,脂质体介导下将pIRES2-EGFP-LMP1、pIRES2-EGFP-BMP2和pIRES2-EGFP质粒转染BMSCs.7d后收集细胞,RT-PCR比较LMP-1、BMP-2及Ⅰ型胶原的表达,检测碱性磷酸酶活性,免疫组化染色比较骨钙素表达. 结果:pIRES2-EGFP-LMP1和plRES2-EGFP-BMP2重组质粒构建成功.重组质粒成功转染BMSCs,RT-PCR证实表达目的基因,LMP-1和BMP-2转染组可以明显促进细胞分泌ALP的活性,诱导Ⅰ型胶原和骨钙素的表达. 结论:LMP-1可以促进BMSCs向成骨细胞分化.
骨髓间充质干细胞 成骨分化 LIM矿化蛋白-1 表达机制
徐希彦 邓毅 李修洋 邓忠良
重庆医科大学附属第二医院骨科 重庆 重庆市中医骨科医院骨科,重庆 400010
国内会议
南昌
中文
648-655
2013-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）