高粱花叶病毒Hcpro、CP和PIPO基因酵母双杂交载体构建及自激活验证
采用同源克隆技术获得侵染甘蔗的高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)的Hcpro、CP、PIPO基因片段.将以上基因片段连接至pGBKT7载体,分别构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Hcpro、pGBKT7-CP和pGBKT7-PIPO,经PCR、酶切及测序鉴定证明重组诱饵载体构建成功后,将重组质粒导入Y2H Gold酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用.结果表明,含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性.含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Leu、SD/-Trp/-Ade和SD/-Trp/-His营养缺陷平板上不能生长,表明重组诱饵质粒表达产物对ADE2、HIS3报告基因无自激活作用.研究结果为下一步利用酵母双杂交系统检测与高粱花叶病毒Hcpro、CP、PIPO蛋白相互作用的甘蔗蛋白提供了基础.
甘蔗 高粱花叶病毒 基因片段 酵母双杂交 载体构建 自激活验证
张雨良 黄启星 张树珍 王健华 余乃通 刘志昕
中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南 海口 571101;农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海南 海口 571101
国内会议
海口
中文
199-203
2014-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）