肥大细胞对布鲁菌S2株的模式识别与活化效应研究
为探讨肥大细胞对猪布鲁菌S2株的模式识别及活化效应,在体外骨髓来源的肥大细胞感染S2株,收集不同时间的上清液,用ELISA法检测肥大细胞释放组胺、IFN-.IL-12的含量;激光共聚焦显微镜检查肥大细胞对S2株的摄取状态;RT-PCR法观察S2株感染后12h和24h肥大细胞TLR4和TLR8基因的mRNA的表达;流式细胞术观察S2株感染后24h肥大细胞TLR4和TLR8蛋白的表达;瑞氏一姬姆萨染色法观察肥大细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞脱颗粒情况. 感染S2株的肥大细胞形态出现了明显的变化,S2株感染后th即出现明显的脱颗粒现象;S2株感染后th,12h肥大细胞上清中组胺含量明显高于正常对照组(P<o.05),IFN-γ、IL-12未被检测到;共聚焦显微镜检查发现感染3 0min和th S2株主要黏附在肥大细胞表面,而未被肥大细胞摄入到细胞内;S2株感染12h后肥大细胞TLR4 mRNA的表达明显高于正常对照组,24h时表达又减弱,S2株感染24h时肥大细胞TLR4蛋白的表达和正常对照组相比增加了;S2株感染12h和24h后肥大细胞TLR8 mRNA和蛋白的表达没变化.S2株能粘附在肥大细胞的表面并能激活肥大细胞,引起其脱颗粒,释放组胺,但在实验观察的时间点内未见IFN-γ和IL-12的分泌,其机制可能是S2株通过TLR4被肥大细胞识别,且不能被肥大细胞摄取.
猪布鲁菌S2株 肥大细胞 模式识别 活化效应
曹志然 闫伟娇 王蓓 戎瑞雪 丁家波 张雷芳 毛开荣 王家鑫
河北业大学动物科技学院免疫学系,河北保定 070001
国内会议
第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医微生物学专业委员会联合学术论坛)
沈阳
中文
92-98
2014-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）