新疆绵羊肺腺瘤病理学诊断与全基因组序列分析
目的：采用临床诊断、镜检观察对新疆某羊场的疑似患有绵羊肺腺瘤病的病羊进行诊断,并用RT-PCR法进行基因片段的扩增,完成新疆绵羊肺腺瘤病毒基因组序列测定. 方法：对病羊进行临床病理学和组织病理学观察,对病毒悬液进行透射电镜观察,从患病绵羊的肺脏组织中提取基因RNA,反转录cDNA.参照GenBank 中已发表的外源性绵羊肺腺瘤病毒美国株基因序列(AF105220),采用Primer Premier 5.0设计引物,设计合成六对引物,对病料样品进行RT-PCR扩增和测序分析. 结果：“小推车试验”时有鼻液流出,剖检时可见肺实变,体积明显增大,表面有大量形态不规则的灰白色结节,切开肺脏时可见大量泡沫状液体从切面渗出.显微镜下观察,疑似患病羊的肺脏有大小不一的腺瘤灶,且肺泡上皮细胞呈乳头状增生,肺泡腔内充满巨噬细胞,病灶中央的细胞核溶解.透射电镜观察到病毒颗粒直径大小约为88nm～127nm.扩增片段为389bp、2017bp、1124bp、2541bp、2054bp、535bp,将其进行双向测序并拼接序列,获得完整的基因组序列,全长7457bp.与美国代表株(AF105220)和英国代表株(AF357971)BLAST在线比对核苷酸同源性结果分别为96％和95％,用DNAstar比对核苷酸同源性分别为93.8％和93.7％,与内源性绵羊肺腺瘤病毒内蒙株(DQ838493)和美国株(EF680300)的核苷酸同源性分别为89.8％和89.9％.与内源性enJSRV 的TM 部分序列进行比较结果显示,其氨基酸序列中具有外源性exJSRV 特有的致病性“YXXM”序列. 结论：说明此基因序列是具有致瘤作用的外源性反转录病毒,这是中国新疆首次报道的外源性绵羊肺腺瘤病毒的全基因组序列,为中国科研工作者进行更深入的研究奠定基础.
绵羊肺腺瘤 病理学诊断 全基因组 序列分析
杨素芳 梁田 赵庆亮 张静 张殿卿 杨霞 盛金良
石河子大学动物科技学院,新疆 石河子 832003
国内会议
中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会
银川
中文
52-64
2014-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）