HIPK2调控COX-2/β-catenin抑制人结直肠癌细胞VEGF的表达
目的:研究同源结构域相互作用蛋白激酶2基因对HCT-116 细胞环氧合酶2及β-catenin表达的影响,探讨HIPK2 对人结直肠癌细胞VEGF表达的调节作用. 方法:采用脂质体转染人结直肠癌细胞,分为正常组、载体质粒组和HIPK2 质粒组,ELISA法检测细胞培养液中VEGF的表达,Western blot检测β-catenin蛋白表达情况.在上述三组细胞中同时转染含COX-2基因启动子质粒pGL3-basic-COX-2 后,双荧光素酶活性检测COX-2 启动子的表达,Real-time PCR检测COX-2 mRNA 的表达水平. 结果:HCT-116 细胞中pEGFP-N3-HIPK2 质粒组的荧光表达量与载体质粒pEGFP-N3 组的表达量基本一致,两组相比无明显差异.转染pEGFP-N3-HIPK2 质粒后,HCT-116 细胞内VEGF 的表达量由对照组的857.54 pg/mL± 65.04 pg/mL 降低至368.32 pg/mL± 98.82 pg/mL,两组相比具有统计学意义(P＜0.05);COX-2 启动子活性由空载体组的266.407×10-5± 40.902×10-5 下降至75.467×10-5 ± 18.666×10-5,两组相比具有统计学意义(P＜0.05);COX-2 mRNA的相对表达量由空载体组的3.48×10-4 ± 0.64×10-4 下调至1.07×10-4± 0.32×10-4,两组相比具有统计学意义(P＜0.05).同时,Western blot结果显示,HIPK2 可明显降低细胞β-catenin的蛋白表达,上调细胞内p-β-catenin蛋白的表达量. 结论:pEGFP-N3-HIPK2可明显上调HCT-116 细胞HIPK2的表达,显著下调人结直肠癌细胞COX-2 的转录表达及VEGF的表达水平,其作用机制可能与其抑制细胞COX-2及β-catenin表达,调节β-catenin-COX-2信号转导有关.
结直肠癌 同源结构域相互作用蛋白激酶2 β-catenin基因 环氧合酶2 血管内皮生长因子 抑制作用
周利红 刘宣 隋华 陈星竹 颜琳琳 冯媛媛 朱惠蓉 李琦
上海中医药大学附属曙光医院肿瘤科
国内会议
第五届国际中医、中西医结合肿瘤学术交流大会暨第十四届全国中西医结合肿瘤学术大会
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2014-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）