抗CD20单克隆抗体ADCC生物学活性方法的建立
目的:建立抗CD20单克隆抗体的ADCC生物学活性检测方法. 方法:利用Jurkat/NFAT-luc+FcγRⅢα细胞系作为效应细胞,WIL2-S细胞系作为靶细胞,通过荧光素酶检测系统(BioGloTM Luciferase Assay system)进行抗CD20单抗的ADCC生物学活性检测,并对试验条件进行优化及方法学验证. 结果:抗CD20单抗在该方法中存在量效关系,且符合四参数方程式:y=(A-D)/”1+(X/C)B”+D.方法经优化确定靶细胞为WIL2-S细胞,抗体稀释浓度为18000ng/ml,1:5倍的稀释倍数,效靶比为6:1,诱导时间为6h.该方法具有良好的专属性,8次独立试验的回归分析、线性及平行性均通过统计学检验;4个不同稀释组回收率样本经3次测定,相对效价分别为44.39±3.93、72.74±2.78、128.28±7.01以及168.19±2.70,变异系数均小于10％,回收率分别为88.78±7.85、96.99±3.70、102.63±5.61以及112.12±1.80. 结论:首次成功建立抗CD20单抗ADCC生物学活性的转基因细胞检测方法,该方法专属性强、重复性好,准确性高,可作为抗CD20单抗ADCC生物学活性的常规检测方法.
抗CD20单克隆抗体 生物学活性 荧光素酶检测系统
王兰 刘春雨 郭玮 于传飞 张峰 王文波 李萌 高凯
中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室,北京 100050
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2014-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）