葡萄糖醛酸化功能模块的构建与应用
目的:构建葡萄糖醛酸化的功能模块,即在大肠杆菌体内构建活性糖醛酸供体UDPGA所需的三种功能蛋白和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(GAT)的功能蛋白,以实现活细胞催化的黄酮的糖基化修饰. 方法:优化大肠杆菌体内自身合成尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)的代谢途径,将从植物黄芩中克隆得到的糖基转移酶基因(SbGAT-W76)转入到上述重组菌,得到4种功能模块不同组合下的九种工程菌. 结果:确定了4种功能模块都存在的工程菌株催化多种黄酮类化合物的糖基化修饰,定向催化黄酮7位的葡萄糖醛酸化.确定了催化体系为M9培养基(含2%葡萄糖),最佳体系为4种模块都存在的体系. 结论:本实验构建了黄酮糖醛酸化反应的4种功能模块,实现了活细胞催化黄酮的糖基化修饰,为此类工程菌的应用提供了基础.
黄芪 葡萄糖醛酸化 功能模块 糖基化修饰
杨燕 王惠敏 王伟
中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室,卫生部天然药物生物合成重点实验室,北京 100050
国内会议
南京
中文
1-7
2014-06-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)