协同型多肽探针的设计及人血清白蛋白亲和相互作用分析
本研究以人血清白蛋白(HSA)为模型蛋白质，选择其表面3个亲水结构域为靶点，基于正义肽一反义肽相互作用原理，进行单点识别的小分子多肽的设计，获得了3条直读反义六肽。通过FMOC固相合成法制备了反义肽，并利用反相高效液相色谱法对粗产品进行了分离纯化，获得了纯度均大于95％的反义肽，用于HSA与反义肽的分子相互作用研究。以甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA)微球作为载体，合成了以HSA为配基的高效亲和填料，构建了HSA高效亲和色谱体系，以考察HSA与3条反义肽的特异性识别能力。与此同时，还利用SPR免标记、实时、高灵敏度的特点，以3条反义肽为识别元件，构建了HSA传感芯片，考察多肽-蛋白质的识别作用。传感信号表明，HSA在3种多肽传感芯片上均呈现快结合、慢解离的动力学行为。通过计算，3条反义肽和HSA的亲和力均达到微摩尔水平，而HSA在对照点芯片上不吸附，显示出特异性的亲和识别能力。将进一步通过设计、优化连接骨架结构，以3条亲和反义肽为基本识别单元，构建多位点识别的协同型多肤探针，尝试用于复杂生物样品中高丰度HSA的去除，为蛋白质组学研究、疾病标志物的发现以及示踪药物运输的研究发展分离分析新方法。
多肽探针 高效液相色谱 人血清白蛋白 亲和识别能力
于洋 黄嫣嫣 金钰龙 刘国诠 赵睿
中国科学院化学研究所,中科院活体分析化学重点实验室,北京,100190
国内会议
威海
中文
294-294
2014-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）