HtrA1表达被沉默的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1的构建
目的:构建pSilencer4.1/HtrA1质粒,稳定转染人滋养细胞株HPT-8. 方法:免疫组化SABC方法检测HtrA1在HPT-8细胞中的表达; 构建pSilencer4.1/HtrA1质粒; 将pSilencer4.1/HtrA1质粒、pSilencer4.1空白质粒转染HPT-8,观察转染后细胞HtrAl表达. 结果:HPT-8约90％左右的细胞胞浆被染成棕黄色,胞核未见明显染色.转染pSilencer4.1/HtrA1质粒的HPT-8细胞的G418筛选浓度为200μg/ml.RT-PCR、western-blot法鉴定转染细胞HtrA1表达,发现转染Psilence-HtrA1重组质粒的细胞中HtrA1表达水平较空白质粒、正常细胞明显下降(P均＜0.05).空白质粒组、HPT-8组间吸光度值无显著差异(P＞0.05). 结论:成功构建稳定的、HtrA1表达被沉默的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1,为下一步研究奠定基础.
病理妊娠 滋养细胞 丝氨酸肽酶1 核糖核酸干扰 免疫组化法
宗璐 苟文丽
西安交通大学第一附属医院妇产科
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2014-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）