新西兰兔BMSCs-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系的构建及其体外评价

摘要：

目的:构建新西兰兔骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系,研究BMSCs的生长和分化情况. 方法:分别构建BMSCs-藻酸钙三维培养体系W组及BMSCs-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系U组在37℃、饱和湿度、5％CO2培养箱内培养,HG-DMEM(FBS15％,TGF-β1 10ng/ml),隔日换液,观察细胞形态变化及凝珠形态变化.第2、4、6周凝珠进行HE染色,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色. 结果:两组三维凝珠培养第10天局部有细胞团簇形成;第21天,大量细胞团簇形成,BMSCs多保持圆球形或类球形.两组细胞增殖及生长能力差异无统计学意义,P＜0.05.培养2周,两组凝珠的甲苯胺蓝染色均呈阳性染色,但无明显细胞外基质形成,Ⅱ型胶原抗体染色均呈弱阳性;培养4周,两组凝珠的甲苯胺蓝染色均显示位于细胞团块外周的细胞呈蓝色,中央的细胞染色不明显,细胞团外基质呈蓝色染色物质较少,中央有较多紫红色物质,Ⅱ型胶原抗体染色均呈强阳性. 结论:U组和W组三维培养凝珠进行HE染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原抗体染色,发现BMSCs的转化生长均无明显的差异,增殖数量的差异也无统计学意义.适量的庆大霉素的局部缓释并未明显影响BMSCs的生长及转化,并达到最小抑菌浓度.庆大霉素对BMSCs及软骨细胞超微结构的影响有待进一步研究探讨.

关键词： 三维缓释培养体系 骨髓间充质干细胞 庆大霉素 藻酸钙 生长能力 分化特性

作者: 沈锋 康一凡

作者单位: 第二军医大学长海医院骨科,上海200433

会议类型: 国内会议

会议名称: 2014中国骨科学学术交流大会暨中国民族卫生协会骨科专家委员组建会议

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 66-75

在线出版日期: 2014-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）