会议专题

一种基于免疫磁珠-多重PCR的沙门氏菌快速检测方法的建立

沙门氏菌的检测普遍采用传统培养方法,该方法繁琐且费时费力.本研究拟结合沙门氏菌特异性免疫磁珠与多重PCR,建立一种快速、准确、简便、灵敏的检测方法,为畜牧生产提供良好的检测手段.通过透射扫描电镜TEM观察磁珠,结果表明磁珠呈规则圆形,大小均一且分散性良好,粒径约800nm;沙门氏菌抗体与磁珠的最佳反应介质为0.01mol/ml PBS缓冲液(PH7.4)、最佳反应时间为3h。结果表明,免疫磁珠富集沙门氏菌的最佳用量为150u1,最佳反应时间为30min;多重PCR可同时对沙门氏菌属、种进行鉴定,灵敏度为4.6×102CFU/ml,特异性良好;免疫磁珠-多重PCR的灵敏度为4.6×10CFU/ml,特异性良好,检测时间为8h;采用该方法对259份样品进行沙门氏菌检测,共检出沙门氏菌38株,其中鸡白痢沙门氏菌22株,肠炎沙门氏菌7株,与传统分离培养方法相比,阳性率一致,但检测时间大大缩短。研究结果表明,本研究建立的免疫磁珠-多重PCR方法用于检测沙门氏菌,具有灵敏度高、检测时间短和操作简便三个特点,为畜禽生产中沙门氏菌检测提供了良好手段。

动物医学 沙门氏菌 免疫磁珠 多重聚合酶链式反应 检测技术

刘必慧 王红宁 雷昌伟 张安云 丁梦蝶 张冬冬

四川大学生命科学学院,动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室,生物资源与生态环境教育部重点实验室,“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台,四川成都610064

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四川省畜牧兽医学会2014学术年会

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2014-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)