采用定量蛋白质组学技术筛选鼻咽癌转移相关甲基化失活基因
目的：采用定量蛋白质组学技术筛选与鼻咽癌发生和转移相关的甲基化失活基因,为揭示鼻咽癌浸润转移机制、提高鼻咽癌患者的治疗效果和生存率提供重要的理论依据和科学基础. 方法：采用MTr法和流式细胞术筛选去甲基化药物5-aza-2”-dC作用于高转移潜能鼻咽癌细胞5-8F的最佳作用浓度和最佳作用时间;采用定量蛋白质组学技术iTRAQ对三种蛋白样本(甲基化抑制剂处理的5-8F细胞,对照组未处理的5-8F细胞和对照组6-10B细胞)进行差异标记,结合二维液相色谱串联质谱分析对标记的蛋白样本进行分离鉴定,找出表达差异的蛋白质. 结果：5μmol/L的5-aza-2”-dC作用5-8F细胞4天,其对于细胞的增殖、细胞周期的阻滞和细胞凋亡的效果最佳.通过对5-8F细胞和6-10B细胞的相对蛋白量表达进行分析目前共鉴定出7种差异蛋白,它们包括RCHY1蛋白、RNA结合蛋白27等,而且在5-8F细胞中的表达均降低.通过对5-aza-2”-dC处理组5-8F和未处理组5-8F细胞的相对蛋白量表达分析发现血清蛋白、核孔蛋白Nup85在甲基化抑制剂处理的5-8F细胞中表达上调,而RCHY1蛋白、RNA结合蛋白27等五种蛋白表达下调. 结论：七种差异蛋白在鼻咽癌的转移过程中发挥重要作用,为进一步研究鼻咽癌转移的分子机制提供了新线索,Nup85基因有可能是与鼻咽癌转移相关的甲基化失活基因,但具体作用机制有待进一步研究.
鼻咽肿瘤 甲基化失活基因 浸润转移机制 定量蛋白质组学技术 患者生存率
秦望森 崔发财
河南省人民医院检验科
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174-183
2014-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）